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腺垂体功能情况可通过对其所支配的靶腺功能状态来反映。
一、性腺功能测定 女性有血雌二醇水平降低，没有排卵及基础体温改变，阴道涂片未见雌激素作用的周期性改变，男性见血辜酣水平降低或正常低值，精液检查精子数量减少，形态改变，活动度差，精液量少。
二、肾上腺皮质功能 24小时尿17- 羟皮质类固醇及游离皮质醇排量减少，血浆皮质醇浓度降低，但节律正常，葡萄糖耐量试验示血糖低平曲线。
三、甲状腺功能测定 血清总T4 、游离T4 均降低，而总T3 、游离T3 可正常或降低。
四、腺垂体分泌激素 如FSH、LH、TSH、ACTH、GH、PRL均减少，但因垂体敝呈脉冲式分泌，故宜相隔15~20 分钟连续抽取等量血液3次，相混后送检测。
同时测定垂体促激素和靶腺激素水平，可以更好地判断靶腺功能减退为原发性或继发性。对于腺垂体内分泌细胞的贮备功能可采用兴奋试验，如 GnRH 、 TRH 、 CRH 、 GHRH 等下丘脑激素来探测垂体激素的分泌反应。腺垂体联合兴奋试验 (TRH 、 GnRH 、膜岛素低血精 ) 结果若低于正常，有判断意义，但正常低值也属异常。应当指出，有时结果可与正常重查， ACTH 试验对于判别原发性或继发性肾上腺皮质功能减退症有重要意义。膜岛素低血糖激发 试验忌用于老年人、冠心病、有惊厥和粘液性水肿的患者。
对于腺垂体 - 下丘脑的病变可用 CT、MRI 辨别，较蝶鞍 X 线和断层摄片更为精确，尽可能通过无创检查，了解病变部位、大小、性质及其对邻近组织的侵犯程度。对于非颅脑病变也可通过胸部 X 线片，胸腹部 CT、MRI，肝、骨髓和淋巴结等部位的活检，用于判断原发性疾病的原因。
